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酶活试剂盒,您选对了吗?

发布时间:2020-06-29    访问量:

 

随着国内生物技术的发展,国内试剂盒市场逐渐壮大,厂家也如雨后春笋般,层出不穷。再加上当今疫情下,国外很多知名生物试剂不能如期供货,并且很多厂家短期内多次发布调价通知,使得很多国内科研用户受到一定的影响,同时给国内试剂盒厂家提供了很好的发展机会,为了抓住机会,国内厂家不断推出各种各样的试剂盒,很多试剂盒的指标名字几乎一模一样,但是质量缺相差悬殊,给使用的客户就造成了选择困难,科研工作者如何选择一款高质量,高性价比、并且适合自己研究需要的产品是目前最迫切的。
 
一、看课题中研究指标目的需求
 
目前市场上测酶的试剂盒名称有:生化试剂盒、生理生化试剂盒、ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等。前两者其实是一个意思,后面的都是ELISA试剂盒的不同叫法。
前两者都是测生物代谢过程中酶活力及大小,酶活力的测定实际上就是测定酶促反应的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表示,单位是U/g或U/ml。酶活试剂盒大多是用吸光法检测底物的生成量,即在测定单位时间内酶催化化学反应量。主要通过产物的增加量或底物的减少量来测定。
ELISA是酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay )简称,是在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques)的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,ELISA过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被,加待测抗体(抗原), 再加相应酶标记抗体(抗原),生成抗原(抗体)--待测抗体(抗原)--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助酶标仪的光吸收计算抗体(抗原)的量。待测抗体(抗原)的定量与有色产生成正比。有人认为ELISA主要是抗原抗体反应,检测的是蛋白(酶)的表达,并不等于测定了酶活性。也有人认为是测了含量酶活(目前学术界存在争议)
 
二、看原理与实验设计
 
国货当自强是每个中国人的期望,但是目前市面上在售的试剂盒,绝大部分的原理与实验设计来源于高校的实验指导书,以及国内期刊发表的文献的摘录以及网络上的资源。里面都有现成的配方与实验方案,很多厂家仅仅是把试剂配制好,打包成试剂盒,供客户使用。对原理仅仅是一知半解,不能领会其内在的含义,也就缺乏了创新的能力。对原理的缺乏领悟,也就造成了对实验方案只能照抄课本,不能进行灵活更新、创新。最终让客户体验度与自己配试剂做没什么区别。
同时实验过程设计不严谨,为了让客户吸光值差值得到正值,该有的样本对照不设置,使得测定结果并不是样本客观反映,最终造成结果与预期相差很大。
实验结果计算公式推导不严谨,分光光度计测的标曲与酶标仪测的标曲通用或者理论上除以光径,这些都是理论推导,并不是实验做出来的。格锐思生物研发的每项指标更有科学性,指标需要标准曲线的必定严格要求研发人员做标曲,并且标曲都是反复做,追求R2至少0.99。并且研究中发现同一个指标采用酶标仪测定的标准曲线与分光光度计测的标准曲线没有任何关系,不会成固定的倍数关系,b值也不是保存不变!
例如:CAT测定的分光法与微板法标准曲线
分光法:标准曲线:y = 0.2093x - 0.0025:x 为 H 2 O 2 标准品(μmoL),y 为ΔA。

图片3.jpg

微板法:标准曲线:y = 0.1412x - 0.0137:x 为 H 2 O 2 标准品(μmoL),y 为ΔA。

图片4.jpg

另外,传统的方法有很多的试剂,现在已经更新换代升级了,有些需要强酸的指标,现在很多强酸已经不好买到了,还有些由于有致癌作用,有毒的试剂,现在已经禁止销售了。
 
三、看售后

                 售后公司销售的闭环又是销售开始。也是与客户深入沟通的桥梁。格锐思生物欢迎有疑问的客户,您的问题也是我们改进的动力。对于原理上与方法上的疑问,格锐思生物很愿意与您探讨,对实验操作上的疑问,我们乐意与您分享,对实验结果的疑问,我们愿意与您一起分析!

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