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高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒发布于:2021-01-05 浏览:125 来源:

一、产品简介:

高铁还原酶(Ferric reductaseFCR)催化高铁螯合物中的Fe3+还原为Fe2+,在部分物种铁元素的吸收中有重要作用。

高铁还原酶(FCR)可催化Fe3+还原为Fe2+Fe2+再与亚铁嗪(ferrozine生成紫红色化合物,该有色物质在562nm处有特征吸收峰,通过测定562nm的增加速率即可得出该酶活大小。

二、所需仪器和用品:

       酶标仪、96孔板、可调式移液器、水浴锅或恒温培养箱、低温离心机、蒸馏水。

三、测试波长:

      562nm

四、提供不同样本处理方式:

    组织样本:

取约0.1g组织,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆。4×12000rpm 离心5min,取上清,置冰上待测。

 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约500万细菌或细胞加入1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次);12000rpm 4离心10min,取上清,置冰上待测。

液体样本:澄清的液体可直接检测;若浑浊则离心后取上清液检测。

五、标准曲线绘制:

      1、 标准品母液(15μmoL/mL);把母液用蒸馏水稀释成以下浓度:0, 0.08, 0.16, 0.24, 0.32, 0.4μmoL/mL

      也可根据实际来调整浓度。

2、 40μL标准品+10μL试剂三+150μL试剂四,混匀,室温静置5min后于562nm处读取吸光值A,依据结果即可制作标准曲线。 

图片2.png

六、结果计算:

按样本鲜重计算:

单位定义:每克组织每分钟催化生成1nmoL Fe2+定义为一个酶活单位(U)。

FCR (nmoL/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.0325)÷0.0986]÷(W×V1÷V)÷T=8.5×(ΔA+0.0325)÷W

3、按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每毫克组织蛋白每分钟催化生成1nmoL Fe2+定义为一个酶活单位(U)。

FCR (nmoL/min/mg prot)=[(ΔA+0.0325)÷0.0986]÷(V1×Cpr) ÷T=8.5×(ΔA+0.0325)÷Cpr

4、按照液体体积计算:

单位定义:每毫升液体每分钟催化生成1nmoL Fe2+定义为一个酶活单位(U)。

FCR (nmoL/min/mL)=[(ΔA+0.0325)÷0.0986]÷V1÷T=8.5×(ΔA+0.0325)÷Cpr

七、相关试剂盒

G0147F 高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒  可见分光光度法  48样 420

G0147W  高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒 微板法  96样  680  内送酶标板