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天冬酰胺合成酶(AS)试剂盒发布于:2021-01-08 浏览:79 来源:

一、产品简介:

      天冬酰胺合成酶(AS,EC 6.3.5.4) 广泛存在于植物和微生物体内,是一个以氨或谷氨酰胺及天冬氨酸为底物催化合成天冬酰胺的关键酶,该酶对于研究植物营养有重要意义,天冬酰胺合成酶(AS) 催化谷氨酰胺的氨基转移到天冬氨酸形成天冬酰胺,同时生成谷氨酸;利用谷氨酸脱氢酶作用于生成的谷氨酸,同时使 NAD + 还原成 NADH,通过测定 NADH在 340nm 处的增加速率,进而得出天冬酰胺合成酶活性大小。

该酶催化反应:ATP+L-aspartate+L-glutamine+H 2 O=AMP+diphosphate+L-asparagine+L-glutamate。

二、所需的仪器和用品:

   酶标仪/分光光度计、96 孔板/1ml比色皿、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵(组织研磨机)

三、波长设置

   340nm

四、样本处理及实验操作

  详见说明书

五、结果计算:

1、按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每毫克组织蛋白每分钟生成 1 nmoL 的 NADH 定义为一个酶活力单位。

AS(nmol NADH/min/mg prot)=[ΔA÷(ε×d)×V4×10 9 ]×(V2÷V3)÷(V1×Cpr) ÷T=160.8×ΔA÷Cpr

2、按样本鲜重计算:

单位定义:每克组织每分钟生成 1nmoL 的 NADH 定义为一个酶活力单位。

AS(nmol NADH /min/g 鲜重)=[ΔA÷(ε×d)×V4×10 9 ]×(V2÷V3)÷(W×V1÷V) ÷T=160.8×ΔA÷W

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